985 resultados para Fígado Teses
Resumo:
Este trabalho teve como objetivo investigar os efeitos da telmisartana (agonista PPAR-gama parcial), losartana (puro bloqueador do receptor AT1 da angiotensina II) e rosiglitazona (agonista PPAR-gama) em modelo experimental de sndrome metablica. Os alvos do estudo foram a presso arterial, metabolismo de carboidratos, resistncia insulnica, inflamao, tecido adiposo e fígado. Camundongos C57BL/6 (a partir de 3 meses de idade) foram alimentados com dieta padro (SC, n = 10) ou dieta hiperlipdica rica em sal (HFHS, n = 40) por 12 semanas. Aps esse tempo, os animais do grupo HFHS foram subdivididos em 4 grupos (n = 10): HFHS (sem tratamento), ROSI (HFHS tratado com rosiglitazona), TELM (HFHS tratado com telmisartana) e LOS (HFHS tratado com losartana) por 5 semanas. O grupo HFHS apresentou um significante ganho de peso e aumento da presso arterial sistlica, hiperinsulinemia com resistncia insulnica, hiperleptinemia, hipertrofia de adipcitos bem como um quadro de esteatose heptica e nveis aumentados da citocina inflamatria interleucina-6 (IL-6). Os animais tratados com telmisartana chegou ao final do experimento com massa corporal similar ao grupo SC, com reverso do quadro de resistncia insulnica, com presso arterial normal, adipcitos de tamanho normal e sem apresentar esteatose heptica. Alm disso, o tratamento com telmisartana aumentou a expresso de PPARγ e adiponectina no tecido adiposo epididimal. A expresso da protena desacopladora-1 (UCP-1) no tecido adiposo branco (TAB) tambm foi aumentada. O tratamento com losartana diminuiu a presso arterial para valores normais, porm com menores efeitos nos parmetros metablicos dos animais. O presente modelo experimental de ganho de peso e hipertenso induzidos por dieta mimetiza a sndrome metablica humana. Neste modelo, a telmisartana aumentou a expresso de UCP-1 no TAB, preveniu o ganho de peso e melhorou a sensibilidade insulina e a esteatose heptica dos camundongos C57BL/6, provavelmente devido ativao PPAR-gama.
Resumo:
Ingesto precoce de dieta enriquecida com leo de peixe reverte alteraes bioqumicas, hepticas e do tecido adiposo na prole de camundongos submetidos restrio protica. 2010. 61 f. Dissertao (Mestrado em Biologia Humana e Experimental) Instituto de Biologia Roberto Alcntara Gomes, Universidade do Estado do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, 2010. Estudos relacionam obesidade na vida adulta com baixo peso ao nascer (programao metablica). O fígado um dos rgos mais afetados pela programao. O leo de peixe rico em cidos graxos poli-insaturados (AGP) da famlia n-3: cido eicosapentaenico (EPA) e docosahexaenico (DHA). O EPA e DHA so relacionados com reduo da presso arterial sistlica e ao anti-inflamatria. Testar a hiptese que a ingesto precoce de leo de peixe (FO) pode reverter os efeitos deletrios da programao na prole adulta de camundongos. Fmeas grvidas foram alimentadas com rao padro (SC) ou dieta restrita em protenas (LP) durante a gestao e lactao. Ao desmame, os seguintes grupos foram formados (de acordo com a suplementao com FO): SC-SC e SC-FO, LP-SC e LP-FO. Foram aferidas massa corporal, ingesto e eficincia alimentar, presso arterial sistlica (PAS), insulina plasmtica, glicose, fator de necrose tumoral (TNF)-alfa, colesterol total (CT), triglicerdeos (TG) e alanina aminotransferase (ALT), morfometria dos adipcitos, estereologia do fígado e expresso protenas SREBP-1c e PPAR-alfa. A prole LP apresentou maior massa corporal, hipercolesterolemia e hiperglicemia Na idade adulta, os animais restritos tornaram-se hipertensos, com esteatose heptica e elevado nvel da SREBP-1c. Entretanto, a prole LP com dieta suplementada com FO ocasionou menor ganho e menor massa corporal final. A dieta FO melhorou o metabolismo lipdico, diminuiu a concentrao plasmtica de CT e TG, reduziu a massa adiposa e o tamanho dos adipcitos. Alm disso, LP-FO mostrou nveis reduzidos da ALT, reduo da esteatose heptica, baixa expresso da SREBP-1c e aumento da expresso do PPAR-alfa, alm de reduo da PAS e dos nveis de TNF-alfa. A dieta com FO teve efeitos benficos revertendo as respostas da programao sobre o metabolismo da glicose e lipdios, estrutura heptica e tecido adiposo na prole adulta programada.
Resumo:
A fibrose heptica o resultado de uma resposta cicatrizante frente a repetidas leses no fígado, e caracterizada pelo acmulo excessivo de protenas da matriz extracelular (MEC) no parnquima heptico, incluindo colgeno, fibronectina, elastina, laminina e proteoglicanos, com a participao de diferentes populaes celulares do fígado. As principais clulas responsveis pela sntese de protenas da MEC na fibrose heptica so as clulas estreladas hepticas ativadas e os miofibroblastos, que surgem aps estmulo inflamatrio e so caracterizadas pela expresso de alfa-actina de msculo liso (α-SMA). Sabe-se que durante a progresso da fibrose heptica, ocorre a morte de hepatcitos e sua substituio por clulas fibrognicas α-SMA+. A apoptose dessas clulas fibrognicas de grande relevncia para a regresso da fibrose e regenerao heptica. Nos ltimos anos, a terapia com clulas tronco de medula ssea tem sido utilizada para estimular a regenerao heptica em diferentes modelos experimentais e protocolos clnicos. A frao mononuclear da medula ssea adulta possui duas populaes de clulas-tronco importantes no tratamento de diversas doenas hepticas: clulas-tronco hematopoiticas e clulas-tronco mesenquimais. O objetivo deste estudo foi analisar a expresso de α-SMA e o processo de apoptose de clulas hepticas durante a fibrose heptica induzida por ligadura do ducto biliar (LDB) e aps o transplante de clulas mononucleares de medula ssea (CMMO). Os fígados foram coletados de ratos dos seguintes grupos: normal, 14 dias de LDB, 21 dias de LDB e animais que receberam CMMO aps 14 dias de LDB, e foram analisados aps 7 dias (totalizando 21 dias de LDB). Para quantificar a expresso de α-SMA por clulas fibrognicas nos grupos experimentais, foi realizada imunoperoxidase para α-SMA, seguida de morfometria no programa Image Pro Plus. Para analisar a apoptose nas clulas hepticas, foi realizada imunoperoxidase e Western Blotting (WB) para caspase-3 (protena apopttica) e imunofluorescncia com dupla-marcao para caspase-3 e α-SMA, seguida de observao em microscpio confocal. Os resultados da quantificao de α-SMA por morfometria mostraram que a expresso de α-SMA aumentou significativamente 14 e 21 dias aps a LDB. Entretanto, essa expresso diminuiu significativamente no grupo tratado com CMMO, que apresentou parnquima heptico mais preservado em relao ao grupo com 21 dias de LDB. Os resultados de imunoperoxidase, WB e microscopia confocal para expresso de caspase-3 demonstraram que essa protena diminuiu nos animais fibrticos com 14 e 21 dias de LDB com relao ao grupo normal, e estava significativamente elevada no grupo tratado com CMMO. A anlise por microscopia confocal demonstrou que algumas clulas coexpressaram α-SMA e caspase-3 nos animais tratados com CMMO, sugerindo a morte de clulas fibrognicas e remodelamento do parnquima heptico.
Resumo:
A interveno farmacolgica pode minimizar ou at mesmo reverter o remodelamento adverso em rgos num modelo de sndrome metablica. Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos das monoterapias e associaes medicamentosas sobre a morfologia do tecido adiposo, remodelamento heptico e pancretico em camundongos C57bl/6 alimentados com dieta very high-fat. Camundongos C57bl/6 machos foram alimentados com dieta very high-fat (HF, 60% de lipdios) ou dieta padro (SC, 10% de lipdios) por 10 semanas, quando foram iniciados os tratamentos: HF-T (HF + Telmisartana, 5.2mg/Kg/dia), HF-S (HF + Sitagliptina, 1.08g/Kg/dia), HF-M (HF + Metformina, 310.0mg/Kg/dia) e as associaes medicamentosas HF-TM, HF-TS e HF-SM. Os grupos tratados tambm tiveram livre acesso dieta high fat e os tratamentos duraram 6 semanas. Tcnicas morfomtricas, estereolgicas, imunohistoqumicas, ELISA, western blotting e microscopia eletrnica foram utilizadas. A dieta high-fat causou sobrepeso, intolerncia oral glucose, hiperinsulinemia, hipertrofia de ilhotas e adipcitos, grau 2 de esteatose hepatica (<33%) reduo da expresso de PPAR-alfa e de GLUT-2, concomitante com aumento da expresso de SREBP-1 no grupo HF (P<0.0001). Por outro lado, todos os tratamentos resultaram em perda de peso significativa, reverso da resistncia insulina, hipertrofia de ilhotas e adipcitos e alvio da esteatose heptica. Somente os grupos HF-T e HF-TS apresentaram massa corporal similar ao grupo SC ao final do experimento, sendo que o ultimo tambm apresentou reverso da esteatose heptica. O aumento da expresso do PPAR-alfa paralelamente ao decrscimo da expresso do SREBP-1 explica os achados favorveis para o fígado. A normalizao do tamanho do adipcito foi consistente com os nveis maiores de adiponectina e com a reduo dos nveis de TNF-alfa (P<0.0001) nos grupos tratados.Todos os tratamentos foram eficazes para controlar a sndrome metablica. Os melhores resultados foram alcanados com a telmisartana e sitagliptina como monoterapias ou como associao entre essas, combinando a ativao parcial do PPAR-alfa no fígado com a extenso do tempo de ao das incretinas
Resumo:
A dieta hiperlipdica (high-fat, HF) materna durante a gestao e/ou lactao aumenta a susceptibilidade da prole para o desenvolvimento de doenas crnicas na fase adulta. Verificar a hiptese que a ingesto materna de dieta HF nos perodos crticos de desenvolvimento (gestao e/ou lactao) predispe doena no alcolica do fígado gorduroso e alteraes pancreticas e no tecido adiposo de camundongos machos adultos. Camundongos C57BL/6 fmeas receberam durante a gestao e/ou lactao dieta padro (standard chow, SC) ou HF. Filhotes machos foram divididos em cinco grupos: SC provenientes de mes SC; G provenientes de mes HF durante a gestao; L provenientes de mes HF durante a lactao; GL/HF provenientes de mes HF durante a gestao/lactao, mantendo a mesma dieta HF no perodo ps-natal (do desmame aos 3 meses deidade); GL provenientes de mes HF durante a gestao/lactao trocando a dieta para SC no perodo ps-natal (do desmame aos 3 meses deidade). Foi analisada ao longo do experimento a massa corporal da prole. No sacrifcio (3 meses), o fígado, o pncreas e a gordura epididimria foram removidos, pesados e processados e o sangue foi coletado para anlise bioqumica. Ao nascimento e ao desmame, filhotes GL/HF foram mais pesados (+6% e +44%, p<0,05, respectivamente) que os filhotes SC. Os filhotes G apresentaram resistncia insulina e menor expresso do transportador de glicose no fígado (GLUT-2). A esteatose heptica foi observada nos grupos G, L, GL e principalmente nos filhotes do grupo GL/HF. A expresso heptica da protena ligante de elementos regulatrios de esteris (SREBP-1c) estava aumentada nos filhotes G, GL e GL/HF. Os filhotes G, GL e GL/HF apresentaram hipertrofia da ilhota pancretica e dos adipcitos quando comparados com o grupo SC. O consumo de dieta HF durante a gestao mostra-se ser o perodo mais prejudicial para os filhotes adultos de camundongos. A programao metablica por dieta HF leva ao remodelamento adverso do fígado, do pncreas e do tecido adiposo
Resumo:
O presente estudo prope uma metodologia para dissoluo de tecidos biolgicos em sistema de micro-ondas com radiao focalizada e posterior anlise elementar por espectrometria de massas com plasma acoplado indutivamente (ICPMS). Foram determinados os elementos arsnio (As), cdmio (Cd), cobre (Cu), chumbo (Pb), nquel (Ni), vandio (V) e zinco (Zn). A matriz nitro-peroxo-sulfrica foi comparada com outra sem o cido sulfrico e apresentou melhor padro de recuperao (acima de 90%) na quantificao dos elementos certificados no material de referncia TORT-2. As interferncias causadas pela presena do cido sulfrico na matriz digestora foram contornadas com o uso da clula de reao/coliso com gs hlio (He) e adio deste cido na composio da curva de quantificao. O ganho analtico proporcionado pelo mtodo de digesto em matriz sulfrica, em sistema no pressurizado, baseia-se no incremento da temperatura reacional e na degradao completa da matria orgnica. As digestes tradicionalmente realizadas para quantificao por ICPMS, compostas unicamente de cido ntrico (HNO3) e perxido de hidrognio (H2O2), no apresentam a mesma eficincia na degradao da matria orgnica em sistemas abertos. Por fim, este mtodo foi aplicado satisfatoriamente em amostras de tecido heptico de peixe Mugil liza (tainha), comprovando sua eficincia em monitorar a bioacumulao, utilizando-se da sensibilidade da tcnica multielementar de ICPMS
Resumo:
As dietas ricas em lipdios saturados provocam efeitos deletrios no metabolismo de glicose, secreo de adipocinas e inflamao, entretanto, outros tipos de lipdios podem modular de forma diferenciada tais efeitos. Assim, o objetivo deste trabalho foi investigar o efeito de diferentes dietas hiperlipdicas no metabolismo de carboidratos, lipdios, no tecido adiposo e no fígado. Camundongos machos C57BL/6 foram divididos em 5 grupos (n=10/grupo): animais que receberam dieta controle (standart chow, SC, 10% de lipdios, grupo controle) e animais que receberam diferentes dietas hiperlipdicas (High-fat, HF, 60% de lipdios): base de banha de porco (lard, grupo HF-L), base de leo de oliva (olive oil, grupo HF-O), base de leo de girassol (sunflower oil, grupo HF-S) e base de leo de canola (canola oil, grupo HF-Ca).Os animais foram alimentados com as dietas experimentas por 10 semanas. Diariamente a ingesto alimentar era verificada e semanalmente a massa corporal foi aferida. A glicose de jejum e o teste intraperitoneal de tolerncia a insulina (TITI) foram realizados uma semana antes da eutansia. No dia da eutansia o sangue foi coletado, o tecido adiposo e o fígado dissecados e pesados. A insulina, leptina, adiponectina, resistina, fator de necrose tumoral alfa (TNFα), interleucina-6 (IL-6), protena quimiottica de moncitos-1 (MCP-1) e inibidor do ativador de plasminognio-1 (PAI-1) foram dosadas por ELISA. Com os dados de insulina e glicose foi calculado o ndice HOMA-IR. Os animais dos grupos HF-L e HF-O apresentaram os maiores valores de insulina, resistina, leptina e HOMA-IR em comparao aos outros grupos (P < 0,0001). No grupo HF-L, os nveis de IL-6 foram maiores quando comparados com os demais grupos (P < 0,0005), enquanto os valores de adiponectina foram os menores (P < 0,0001). A quantidade de gordura subcutnea e visceral foi maior no grupo HF-L e este grupo apresentou tambm um aumento no dimetro dos adipcitos. Entretanto a relao:visceral:subcutnea foi maior nos grupos HF-L e HF-O quando comparado com os demais grupos. Alm disso, houve aumento de triglicrides hepticos e de esteatose heptica nos animais dos grupos HF-L e HF-O. Nossos achados nos permitem concluir que animais que so alimentados com dietas hiperlipdica, a distribuio do tecido adiposo, o metabolismo de carboidratos, acumulo de triglicrides hepticos e esteatose heptica so mais influenciados pelo tipo de lipdios do que pela quantidade.
Resumo:
O consumo materno de dieta hiperlipdica saturada durante a gestao e lactao favorece o desenvolvimento obesidade e anormalidades metablicas na prole. Este trabalho teve como objetivo testar a hiptese de que a prole proveniente de mes alimentadas com dieta hiperlipdica durante a gestao e lactao desenvolve obesidade e anormalidades metablicas e de que essas alteraes esto associadas a resistncia central a leptina. As ratas grvidas da linhagem C57BL/6 (n=20) foram alimentadas com dieta standard chow (SC; 19% de lipdeos) ou dieta hiperlipdica (HF; 49% de lipdeos) durante todo perodo de gestao e lactao. Aps o desmame, a prole de machos foi dividida em quatro grupos experimentais, de acordo com a dieta das mes e da prole: SC(mes)/SC(prole), SC/HF, HF/SC e HF/HF (n=12/gp). As caractersticas metablicas foram avaliadas pela curva de ganho de peso; medida da presso arterial; glicose de jejum, rea sob a curva no teste oral de tolerncia a glicose; concentraes de triglicerdeos hepticos e estimativa da esteatose heptica; anlise plasmtica de insulina e leptina e; distribuio e anlise morfolgica do tecido adiposo. Para analisar a sensibilidade a leptina, os quatro grupos originais foram subdivididos em dois grupos cada (veculo ou leptina-5g) para verificar a resposta alimentar (g) aps o tratamento agudo intracerebroventricular (ICV) e a sinalizao hipotalmica de leptina. A dieta HF durante o perodo ps-desmame (grupo SC/HF), durante gestao e lactao (grupo HF/SC), ou ambos os perodos (grupo HF/HF), promoveu aumento da massa corporal. No que concerne as alteraes hepticas e a ao da insulina, a dieta HF durante o perodo perinatal favoreceu 25% de esteatose heptica, hiperinsulinemia e hiperleptinemia, enquanto os demais grupos experimentais SC/HF e HF/HF, demonstraram um padro mais exacerbado. A avaliao da distribuio e morfometria do tecido adiposo demonstra o importante papel da dieta HF perinatal em amplificar a habilidade de estocar gordura visceral na prole. Considerando a ao central da leptina nos grupos tratados, a resposta alimentar mostrou-se atenuada em SC/HF, indicando o efeito determinante da dieta ps-desmame sobre a ao da leptina nesse modelo. Os resultados indicam fortemente que a dieta HF materna afeta a sade da prole adulta. Especificamente, a prole programada apresenta esteatose heptica, hipertrofia de adipcitos, aumento de gordura visceral, hiperleptinemia e resistncia a insulina. Esse fentipo no est associado a resistncia central a leptina na prole aos trs meses de idade.
Resumo:
A fibrose heptica o resultado de uma leso crnica, com a ativao de clulas inflamatrias e fibrognicas no fígado, as quais levam a um acmulo excessivo de protenas de matriz extracelular (MEC). Essas alteraes resultam na morte de clulas do fígado, com desorganizao e perda da funo do parnquima heptico. A cirrose o estgio avanado da fibrose, e culmina na falncia heptica, uma condio potencialmente fatal cujo nico tratamento efetivo o transplante de fígado, o qual limitado pela disponibilidade de rgos. Na busca por terapias alternativas visando a regenerao heptica, o transplante de clulas mononucleares de medula ssea (CMMO) mostrou resultados benficos e promissores em modelos animais e alguns protocolos clnicos. Entre essas clulas, esto as clulas-tronco hematopoiticas e mesenquimais, que apresentam potencial regenerativo e modulador da resposta inflamatria. Este estudo pretendeu avanar na compreenso dos mecanismos pelos quais as CMMO podem ajudar na regenerao heptica. Ratos com fibrose heptica induzida por ligadura do ducto biliar (LDB) foram transplantados com CMMO e comparados com ratos com fibrose sem transplante e ratos normais. Parmetros hepticos como componentes da MEC (colgeno total, colgenos tipos I e IV, laminina, metaloproteinases de matriz MMPs), componentes celulares (clulas fibrognicas, clulas de Kupffer e colangicitos) e enzimas hepticas foram analisados por microscopia de luz, microscopia confocal, western blotting e espectrofotometria. Os resultados mostraram que o transplante de CMMO contribui para a regenerao heptica de maneira global, (a) diminuindo o acmulo de colgeno e laminina; (b) aumentando a produo de MMPs que favorecem o remodelamento da MEC, principalmente por clulas de Kupffer; (c) normalizando a quantidade de colangicitos e diminuindo a quantidade de clulas fibrognicas; e (d) normalizando os nveis sanguneos das enzimas hepticas. Portanto, ns sugerimos que as CMMO podem ajudar na regenerao heptica atravs de mecanismos parcrinos e se diferenciando em clulas de Kupffer, contribuindo para a secreo de fatores antiinflamatrios e anti-fibrognicos no fígado com fibrose.
Resumo:
As associaes entre obesidade, doena heptica gordurosa no alcolica (NAFLD) e diabetes mellitus tipo 2 (DM2) so bem estabelecidas, e o sistema renina-angiotensina (SRA) pode proporcionar uma ligao entre eles. O bloqueio do SRA em diferentes nveis pode estar relacionado a respostas na resistncia insulina, remodelagem do pncreas e do fígado em um modelo de obesidade induzida por dieta. Camundongos C57BL/6 foram alimentados com uma dieta hiperlipdica (HF) durante oito semanas e depois tratados com alisquireno (50 mg/kg/dia), enalapril (30 mg/kg/dia) ou losartana (10 mg/kg/dia) por um perodo adicional de seis semanas. As drogas foram incorporadas na dieta. Avaliou-se a massa corporal (MC), presso arterial, consumo e gasto energtico (GE), metabolismo da glicose e lipdico, histopatologia pancretica e heptica, anlise hormonal, imunohistoqumica, perfil gnico e/ou proteico do SRA no pncreas, gliconeognese heptica, sinalizao da insulina, oxidao e acmulo lipdico. Todos os inibidores do SRA reduziram significativamente o aumento da presso arterial nos camundongos alimentados com dieta HF. O tratamento com enalapril, mas no alisquireno ou losartana, reduziu o ganho de MC e a ingesto alimentar; aumentou o GE; amenizou a intolerncia glicose e resistncia insulina; melhorou a massa de clulas alfa e beta; impediu a reduo da adiponectina plasmtica e restaurou a sensibilidade leptina. Alm disso, o tratamento com enalapril melhorou a expresso proteica nas ilhotas pancreticas de Pdx1, GLUT2, ECA2 e do receptor Mas. O tratamento com losartana apresentou uma elevao na expresso proteica de AT2R no pncreas. No fígado, a administrao de enalapril atenuou a esteatose heptica, o acmulo de triglicerdeos e preveniu o aumento dos nveis de PEPCK, G6Pase e do GLUT2. Do mesmo modo, o enalapril melhorou a transduo dos sinais da insulina atravs da via IRS-1/Akt, bem como reduziu os nveis de expresso gnica e/ou proteica de PPAR-gama, SREBP-1c e FAS. Esses resultados sugerem que a inibio da ECA com enalapril atenuou muitos efeitos deletrios provocados pelo consumo da dieta HF, incluindo: normalizao da morfologia e funo das ilhotas pancreticas, proteo contra a resistncia insulina e acmulo de lipdios no fígado. Estes efeitos protetores do enalapril podem ser atribudos, principalmente, reduo no ganho de MC e ingesto alimentar, aumento do GE, ativao do eixo ECA2/Ang(1-7)/receptor Mas e dos nveis de adiponectina, o que promove uma melhora na ao heptica da insulina e leptina, normalizao da gliconeognese, amenizando a NAFLD.
Resumo:
A doena heptica gordurosa no alcolica uma desordem multifatorial causada principalmente por excesso nutricional e resistncia insulina, com prevalncia estimada de 20-40% nos pases ocidentais. A dieta hiperlipdica e/ou rica em sacarose pode influenciar no desenvolvimento da esteatose heptica associada obesidade e a resistncia insulina. O fígado, por assumir papel central no controle metablico, um rgo alvo nos casos de excesso alimentar, ocasionando, principalmente, acmulo de gotculas de gordura nos hepatcitos. Este trabalho teve como objetivo avaliar o incio das alteraes morfolgicas e metablicas no fígado e no tecido adiposo de camundongos suos machos alimentados com dieta hiperlipdica e/ou rica em sacarose. Camundongos suos machos aos trs meses de idade foram divididos em quatro grupos nutricionais: dieta padro (SC), dieta hiperlipdica (HF), dieta rica em sacarose (HSu) e dieta hiperlipdica rica em sacarose (HFHSu). Os animais receberam as respectivas dietas durante quatro semanas. A massa corporal, a ingesto alimentar e a tolerncia oral glicose foram avaliados. Ao sacrifcio, o fígado e os depsitos de gordura corporal foram removidos e processados para anlises histomorfomtricas e moleculares. As amostras de sangue foram obtidas para anlises bioqumicas plasmticas. Os dados foram expressos como mdia e erro padro da mdia e as diferenas foram testadas por one-way ANOVA com ps-teste de Holm-Sidak, e foi considerado o nvel de significncia de p<0,05. Os grupos HF e HFHSu apresentaram-se mais pesados quando comparados aos grupos SC e HSu. Os animais dos grupos HF, HSu e HFHSu apresentaram intolerncia glicose, esteatose heptica e aumento de triglicerdeos hepticos quando comparados ao grupo SC (p<0,0005). Adicionalmente, houve elevao na expresso heptica das protenas transportador de glicose 2 (GLUT-2), protena de ligao ao elemento regulador do esterol 1-c (SREBP1-c), fosfoenolpiruvato carboxiquinase (PEPCK), glicose -6- fosfatase (G6PASE), substrato do receptor da insulinaI-1 (IRS-1) e protena quinase B (AKt/ou PKB) e reduo da expresso no fígado do receptor ativador de proliferao peroxissomal (PPAR-α) nos grupos experimentais em comparao com o grupo SC (p<0,0005). A administrao de dieta hiperlipdica e/ou rica em sacarose promoveu intolerncia glicose e danos hepticos (hepatomegalia, esteatose, reduo da beta-oxidao, aumento na lipognese e na produo de glicose) em camundongos machos adultos.
Resumo:
Hbitos inadequados no estilo de vida, pelo consumo exacerbado de dietas ricas em gorduras e acares (frutose e sacarose), correlacionam-se positivamente com o desenvolvimento da obesidade, da resistncia insulina (RI) e da esteatose heptica no alcolica (NAFLD). O estudo teve como objetivo avaliar a magnitude dos efeitos da administrao crnica de dietas ricas em gordura e/ou frutose, e ainda, comparar os efeitos dos acares isoladamente (frutose e sacarose) sob as alteraes bioqumicas, o perfil inflamatrio, as respostas morfofuncionais e as expresses proteicas e gnicas de fatores de transcrio envolvidos na lipognese, na beta-oxidao, na gliconeognese e no estresse oxidativo no fígado. Camundongos machos C57BL/6 foram divididos em dois experimentos: 1) Dieta controle/standard chow (SC), dieta high fat (HF 42%), dieta high frutose (HFr 34%) e dieta high fat + high frutose (HFHFr - 42% fat + 34% frutose) por 16 semanas; 2) Dieta controle/standard chow (SC), dieta high frutose (HFru 50%) e dieta high sacarose (HSu 50%) por 15 semanas. Ao final dos experimentos foram observados: 1) No houve diferena na massa corporal entre os animais HFr e SC, s foi observado ganho de peso nos grupos HF e HFHFr. Houve ainda aumento do colesterol total, dos triglicerdeos plasmticos e hepticos e RI nos grupos HF, HFr e HFHFr. No fígado, foi observado NAFLD com aumento na expresso de SREBP-1c e PPAR-γ, e reduo de PPAR-α. A gliconeognese mediada pelo GLUT-2 e PEPCK tambm foi aumentada nos grupos HF, HFr e HFHFr em relao ao grupo SC. reas de necroinflamao tambm foram observadas nos animais HFr e HFHFr; 2) No houve diferena na massa corporal entre os grupos SC, HFru e HSu. Porm, houve aumento do colesterol total, dos triglicerdeos plasmticos e hepticos, da RI, das adipocinas (IL-6, resistina, MCP-1 e leptina), e reduo da adiponectina. No fígado, abundante NAFLD com predominncia da expresso proteica e gnica de SREBP-1c, PPAR-γ e reduo de PPAR-α; e desequilbrio antioxidante com reduo da SOD, da Catalase e da GRx nos grupos HFru e HSu quando comparados ao SC. No houve diferena na GPx entre os trs grupos. Ainda foi observado aumento na expresso proteica de G6Pase, PEPCK e GLUT-2, envolvidos na gliconeognese heptica nos grupos HFru e HSu. reas de necroinflamao, caracterstico da transio NAFLD-NASH, tambm foram observados. Os resultados permitem concluir que, independente do aumento da massa corporal, a administrao crnica de dietas ricas em frutose e sacarose tem efeitos similares aos observados com o consumo de dieta hiperlipdica. Parece que a RI e a NAFLD sejam os precursores destas alteraes.
Resumo:
"Aborda dois Projetos de Lei na rea de sade pblica em tramitao no Congresso Nacional. As proposies referidas so: o Projeto de Lei n 5522, de 2005, que dispe sobre a obrigatoriedade da implementao de protocolo teraputico para a preveno da transmisso vertical do HIV, e o Projeto de Lei n. 2.745, de 2003, que dispe sobre as regras para elaborao da lista nacional de receptores de fígado do Sistema Nacional de Transplante."
Resumo:
O oxignio fundamental para os vertebrados. No entanto, variaes dos nveis de oxignio na gua podem provocar estresse oxidante em peixes porque privao de oxignio seguida de reoxigenao forma espcies reativas de oxignio (ERO) em clulas. Nveis intracelulares de ERO aumentados favorecem que molculas de protenas, fosfolipdios e cidos nucleicos sofram alteraes, vindo a prejudicar muitas funes celulares. No Pantanal, habitat do pacu, o nvel de oxignio varia circadianamente na gua das lagoas rasas que acabam isoladas dos rios na seca. O pacu evoluiu sob a presso contnua da exposio aos efeitos prejudiciais das ERO causados pelos pulsos de inundao. A melatonina, uma indolamina produzida na glndula pineal, influencia os nveis de atividade de enzimas antioxidantes que reduzem ERO, alm de ser capaz de doar eltrons ou captar radicais livres de forma no enzimtica. Os nveis de melatonina no pacu so mais altos no vero e menores no inverno. Isoenzimas de glutationa S-transferases que conjugam o tripetdeo glutationa com o 4-hidroxinonenal, aldedo derivado da peroxidao de cidos graxos por ERO, so importantes para evitar alterao funcional de protenas por ligao do 4-hidroxinonenal sua estrutura. Neste trabalho procuramos relao entre estresse oxidante, nveis de atividades de glutationa S-transferase e melatonina, para estabelecer se a melatonina ajudaria pacus a superar os efeitos deletrios das espcies reativas de oxignio. Ensaiamos atividades de isoenzimas de glutationa S-transferases no citosol de fígado de pacus mantidos em normoxia, hipoxia, reoxigenao e hiperoxia no inverno e no vero. Medimos o efeito da melatonina in vitro e in vivo sobre as atividades de isoenzimas de glutationa S-transferase. Medimos os efeitos do estresse oxidante sobre a ligao do 4-hidroxinonenal com protenas nos fígados de pacus tratados com melatonina. Somente as isoenzimas que conjugam 4-hidroxinonenal com glutationa mostraram menor atividade no inverno em relao ao vero; outras isoenzimas de glutationa S-transferases no alteram suas atividades sazonalmente. In vitro a melatonina no alterou a atividade de isoenzimas de glutationa S-transferase que conjugam o 4-hidroxinonenal, mas inibiu outras isoenzimas de glutationa S-transferase. In vivo a melatonina aumentou a atividade encontrada no inverno das isoenzimas que conjugam o 4-hidroxinonenal para os nveis do vero. A ligao de 4-hidroxinonenal com protenas foi menor em pacus inoculados com melatonina. Nossos resultados mostram que a melatonina pode influenciar os efeitos de ERO em fígado de pacus. Ficou claro que a melatonina do plasma mantm os nveis de atividade conjugadora de 4-hidroxinonenal do fígado em pacus e que a baixa produo de melatonina no inverno no adequada para a conjugao do 4-hidroxinonenal em fígado de pacus.
Resumo:
As hepatites crnicas por vrus so as mais frequentes, destacando-se os vrus das hepatites B (VHB) e C (VHC). O estudo anatomopatolgico da bipsia heptica considerado o padro ouro para avaliar com preciso a distoro arquitetural e o grau de fibrose do parnquima do fígado, importantes fatores prognsticos para os pacientes portadores de hepatites crnicas virais. Na avaliao histopatolgica atual, em adio aos relatos subjetivos das alteraes histolgicas, escores semiquantitativos que correlacionam achados morfolgicos com graus numricos so usados, tais como os reconhecidos escores de Ishak e METAVIR. Entretanto, em todos estes sistemas h a desvantagem da subjetividade do examinador e da incorporao de alteraes categricas, sem referncias s mudanas quantitativas do colgeno heptico. Tcnicas de anlise de imagens digitais (AID) que fornecem quantificao objetiva dos graus de fibrose em amostras histolgicas tm sido desenvolvidas. Todavia, o alto custo e dificuldade ao acesso das tecnologias descritas restringem seu uso a poucos centros especializados. Este estudo visa o desenvolvimento de uma tcnica de custo acessvel para a anlise de imagens digitais da fibrose heptica em hepatites crnicas virais. Foram estudadas 304 bipsias de pacientes com hepatite crnica por vrus B e C, obtidas atravs de agulhas Menghini. Todas as amostras tinham pelo menos 15 mm de comprimento ou cinco espaos-porta completos e foram coradas pelo mtodo Tricrmico de Masson. O estadiamento foi feito por um nico hepatopatologista experiente, sem o conhecimento dos dados clnicos dos pacientes. Os escores de Ishak e METAVIR foram aplicados. As imagens microscpicas foram digitalizadas. Os ndices de fibrose foram determinados de forma automatizada, em tcnica desenvolvida no programa Adobe Photoshop. Para o escore de Ishak, observamos os seguintes ndices de Fibrose (IF) mdios: 0,8% 0,0 (estgio 0), 2.4% 0,6 (estgio 1), 4,7% 1,6 (estgio 2), 7,4% 1,4 (estgio 3), 14,9% 3,7 (estgio 4), 23,4% 2,9 (estgio 5) e 34,5% 1,5 (estgio 6). Para a classificao METAVIR: 0,8% 0,1 (estgio F0), 3,8% 1,8 (estgio F1), 7,4% 1,4 (estgio F2), 20,4% 5,2 (estgio F3) e 34,5% 1,5 (estgio F4). Observamos uma excelente correlao entre os ndices de fibrose da AID e os escores de Ishak (r=0,94; p<0,001) e METAVIR (r=0,92; p<0,001). Em relao indicao de tratamento antiviral, foi observado IF mdio de 16,4%. Em relao ao diagnstico de cirrose, foi observado IF mdio de 26,9%, para o escore de Ishak, e 34,5% para a classificao METAVIR. A reprodutibilidade intra-observador foi excelente. Este novo mtodo de anlise de imagens digitais para a quantificao de fibrose heptica tem custo acessvel e foi desenvolvido com tecnologia que est disponvel em todo o mundo, permitindo identificar com preciso todos os estgios de fibrose, com excelente reprodutibilidade intra-observador.
